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貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價 | 貨期 | 庫存 |
JD1227182068 | DNA含量檢測試劑盒 | 50T | -- | 699元 | 現(xiàn)貨 | 3天 |
JD1227182067 | DNA含量檢測試劑盒 | 20T | -- | 399元 | 現(xiàn)貨 | 3天 |
性狀: | 細胞周期是指連續(xù)分裂細胞從一次有絲分裂結(jié)束到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個過程。在這個過程中,細胞遺傳物質(zhì)復(fù)制并加倍,且在分裂結(jié)束時平均分配到兩個子細胞中去。細胞周期又可以分為間期和有絲分裂期,細胞間期常劃分為休眠期(G0),DNA合成前期(G1),DNA合成期(S),DNA合成后期(G2),整個周期可表示為G1→S→G2→M。DNA周期檢測可用來反應(yīng)細胞周期的各個期的狀況,即細胞增殖狀況。利用細胞內(nèi)DNA能夠和熒光染料(如碘化丙啶PI)結(jié)合的特性,細胞各個時期其DNA含量不同從而結(jié)合的熒光染料不同,流式細胞儀檢測的熒光強度也不一樣。 細胞發(fā)生凋亡時,由于胞漿和染色質(zhì)濃縮,核裂解,產(chǎn)生凋亡小體,使細胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細胞凋亡的早期,細胞對前向角光散射的能力顯著降低,對90°角光散射的能力增加或沒有變化。在細胞凋亡的晚期,前向角和90°角光散射的信號均降低。因此可以通過流式細胞儀測定細胞光散射的變化來觀察凋亡細胞。用PI對細胞進行染色,凋亡細胞由于總DNA量降低,于正常G0/G1細胞群前出現(xiàn)DNA低染細胞群,即G1峰前出現(xiàn)亞二倍體峰(sub-G1),即細胞凋亡群。
本試劑盒可應(yīng)用于培養(yǎng)細胞(懸浮、貼壁)的DNA含量(細胞周期)檢測。 |
質(zhì)量標準: | 使用方法:(僅供參考) 1, 用適當?shù)姆椒ㄕT導(dǎo)細胞凋亡,同時設(shè)立陰性對照組,并收集細胞。 2, 用PBS洗滌細胞一次,1500rpm,5min離心收集,調(diào)整細胞濃度為1×106/mL,取1mL單細胞懸液。 3, 制備的單細胞懸液離心后,去除上清,在細胞中加入70%預(yù)冷乙醇500μL固定2小時至過夜,4℃保存,染色前用PBS洗去固定液;如需要,細胞懸液可用200目細胞篩網(wǎng)過濾一次。 4, 細胞沉淀中加100μL RNase A 溶液,重懸細胞,37℃水浴30min。 5, 再加入400μL PI染色液混勻,4℃避光孵育30min。 6, 上機檢測,記錄激發(fā)波長488nm處紅色熒光。 注意事項: 1. 碘化丙啶(PI)染色液保存和使用過程中應(yīng)注意避光。 2. PI有毒,操作時應(yīng)戴手套,并避免污染。 3. 熒光染料都存在淬滅問題,建議染色后盡量當天完成檢測。 |
貯存: | -20℃避光保存,一年有效。 |