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大鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒
Rats spleen lymphocyte separation medium kit
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JD1227182034 大鼠脾臟淋巴細(xì)胞分離液試劑盒 200ml -- 1730元 咨詢客服 3天
物流提示:偏遠(yuǎn)地區(qū)如新疆西藏寧夏甘肅等地可能無法運(yùn)送液體,下單前請(qǐng)聯(lián)系客服。
性狀: 試劑盒內(nèi)容:
全血及組織稀釋液            100ml
細(xì)胞洗滌液                        100ml
試劑C                                 100ml
試劑F                                  100ml
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): 【檢驗(yàn)方法】
全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。
1. 首先制備脾臟組織單細(xì)胞懸液,制備方法詳見“脾臟組織單細(xì)胞懸液制備技術(shù)”。
2. 取一支 15ml 離心管,加入與脾臟組織單細(xì)胞懸液等量的分離液(注:分離液最少不得少于 3ml)。
3. 用吸管小心吸取脾臟組織單細(xì)胞懸液加于分離液液面上,400-500g,離心 20-30min。(注:根據(jù)脾臟組織單細(xì)胞懸液量確定離心條件,脾臟組織單細(xì)胞懸液量越大,離心力越大,離心時(shí)間越長(zhǎng),具體離心條件需客戶自行摸索,以達(dá)到最佳分離效果)。
4. 離心后,此時(shí)離心管中由上至下分為四層。第一層為稀釋液層。第二層為環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層。第三層為透明分離液層。第四層為紅細(xì)胞層。
5. 用吸管小心吸取第二層環(huán)狀乳白色淋巴細(xì)胞層到另一 15ml 離心管中,向離心管中加入10ml 清洗液混勻細(xì)胞。
6. 250g,離心 10min。
7. 棄上清。
8. 用吸管以 5ml 清洗液重懸所得細(xì)胞。
9. 250g,離心 10min。
10. 重復(fù) 7、8、9,棄上清后以 0.5ml 后續(xù)實(shí)驗(yàn)所需相應(yīng)液體重懸細(xì)胞。
【注意事項(xiàng)】
1. 全過程樣本、試劑及實(shí)驗(yàn)環(huán)境均需在 20±2℃的條件下進(jìn)行。為獲得最佳的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,最好在取樣 2h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),樣品存放時(shí)間越長(zhǎng),細(xì)胞分離效果越差。樣品放置超過 6h 后分離效果更差甚至不能達(dá)到分離目的。
2. 本實(shí)驗(yàn)最好不要使用高聚合材質(zhì)(如聚苯乙烯)的塑料制品,應(yīng)使用無靜電、低靜電離心管及未經(jīng)堿處理過后的玻璃制品,因?yàn)殪o電作用將導(dǎo)致細(xì)胞貼壁、堿處理的玻璃表面會(huì)變成毛面,影響細(xì)胞分離效果。
3. 吸取過多的淋巴細(xì)胞層及分離液層會(huì)導(dǎo)致分離液交界處的粒細(xì)胞被吸出從而使混雜的粒細(xì)胞數(shù)量增加。
4. 分離液用量大于脾臟組織單細(xì)胞懸液樣本時(shí),分離效果更佳。
貯存: 18-25℃保存,有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌,需無菌條件操作。無菌條件下操作,啟封后置常溫保存。如 4℃保存,本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶,影響分離效果。