His標(biāo)簽蛋白純化樹脂(Ni-NTA Resin)是用于純化6×His標(biāo)簽重組蛋白的一種純化介質(zhì),它是由4%交聯(lián)的Sepharose耦連了一種四齒螯合劑NTA而得. 它可用于在非變性或變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)表達(dá)的6xHis標(biāo)簽重組蛋白。NTA,含有四個螯合區(qū),較一般的三齒螯合劑能更好的結(jié)合Ni2+。6×His 可與Ni2+螯合,從而使His標(biāo)簽蛋白結(jié)合在Ni-NTA純化介質(zhì)上,未結(jié)合的蛋白被洗滌下去,結(jié)合在介質(zhì)上的蛋白經(jīng)過一定濃度的咪唑或低PH緩沖液的溫和洗脫下來,從而得到高純度的目的蛋白。 主要特征 該純化介質(zhì)與His標(biāo)簽蛋白具有極高的親和力,可達(dá)5-20 mg/ml。 可在非變性和變性條件下純化任何表達(dá)系統(tǒng)所得的His標(biāo)簽蛋白。 純化程序簡單,所得的蛋白純度可高達(dá)95%。 Ni-NTA可再生4-6次,重復(fù)使用。 組分 50%的懸浮液(20%乙醇),已螯合Ni2+。 應(yīng)用 His標(biāo)簽蛋白的純化。 蛋白結(jié)構(gòu)與功能研究。 蛋白-蛋白以及蛋白-DNA之間相互作用的研究。 配體-受體之間相互作用的研究。 |