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貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 包裝 | 單價 | 貨期 | 庫存 |
JD1227173460 | 總RNA提取試劑盒 | -- | 50T | 1155元 | 現(xiàn)貨 | 3天 |
JD1227173459 | 總RNA提取試劑盒 | -- | 100T | 1687.4元 | 現(xiàn)貨 | 3天 |
性狀: | 試劑盒組成 50 100 保存 有效期 裂解液 50ml 100ml 2-8℃ 一年 漂洗液 15ml 30ml RT 一年 洗柱液 50ml 100ml RT 一年 RNase free ddH2O 15ml 30ml RT 一年 RNase free吸附柱 50個 100個 RT 一年 RNase free收集管(2ml) 50個 100個 RT 一年 |
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): | 操作步驟: 1. 樣品處理: a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml 裂解液中混勻。 b. 動物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織加1ml 裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。 c. 貼壁細(xì)胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細(xì)胞,每106細(xì)胞加1ml 裂解液。用取樣器吹打混勻。 d. 細(xì)胞懸液:離心收集細(xì)胞。每106動物、植物和酵母細(xì)胞或每107細(xì)菌細(xì)胞加1ml 裂解液混勻。 e. 血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3 倍體積紅細(xì)胞裂解液,混勻后室溫放置10 分鐘,10000rpm離心1 分鐘。棄上清,若沉淀含有紅細(xì)胞,可加入2 倍體積紅細(xì)胞裂解液重復(fù)裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml 裂解液混勻。 2. 將處理后的樣品在室溫放置5 分鐘,使得核酸蛋白復(fù)合物完全分離。 3. 向勻漿樣品中加0.2ml氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置3-5分鐘。 4. 2-8℃ 12000 rpm 離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中,把水相轉(zhuǎn)移到新管中,不要吸到沉淀。 5. 吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室溫放置2分鐘,2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。 6. 第4 步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻,加入吸附柱靜置2 分鐘,2-8 12000rpm ℃ 離心2min,棄廢液。 7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。 8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8 12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。 9. 12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。 10. 將吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O ,室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即得到RNA 注意事項: |