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首頁 生化科研試劑 分子生物試劑及試劑盒 核酸分離與純化
總RNA提取試劑盒
別名: --
Cas號: -- M D L: --
分子式: -- 分子量: --
貨號 品名 規(guī)格 包裝 單價 貨期 庫存
JD1227173460 總RNA提取試劑盒 -- 50T 1155元 現(xiàn)貨 3天
JD1227173459 總RNA提取試劑盒 -- 100T 1687.4元 現(xiàn)貨 3天
物流提示:偏遠(yuǎn)地區(qū)如新疆西藏寧夏甘肅等地可能無法運送液體,下單前請聯(lián)系客服。
性狀: 試劑盒組成 50 100 保存
有效期
裂解液 50ml 100ml 2-8℃ 一年
漂洗液 15ml 30ml RT 一年
洗柱液 50ml 100ml RT 一年
RNase free ddH2O 15ml 30ml RT 一年
RNase free吸附柱 50個 100個 RT 一年
RNase free收集管(2ml) 50個 100個 RT 一年
質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn): 操作步驟:
1. 樣品處理:
 a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml 裂解液中混勻。
 b. 動物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg 組織加1ml 裂解液,用組織研磨杵或勻漿器勻漿處理。
 c. 貼壁細(xì)胞:直接在培養(yǎng)板中加入裂解液裂解細(xì)胞,每106細(xì)胞加1ml  裂解液。用取樣器吹打混勻。
 d. 細(xì)胞懸液:離心收集細(xì)胞。每106動物、植物和酵母細(xì)胞或每107細(xì)菌細(xì)胞加1ml 裂解液混勻。
 e. 血液處理:取0.2-1ml新鮮血液加3 倍體積紅細(xì)胞裂解液,混勻后室溫放置10 分鐘,10000rpm離心1 分鐘。棄上清,若沉淀含有紅細(xì)胞,可加入2 倍體積紅細(xì)胞裂解液重復(fù)裂解步驟。離心后沉淀加入1 ml 裂解液混勻。
2. 將處理后的樣品在室溫放置5 分鐘,使得核酸蛋白復(fù)合物完全分離。
3. 向勻漿樣品中加0.2ml氯仿,蓋好管蓋,劇烈振蕩15秒,室溫放置3-5分鐘。
4. 2-8℃ 12000 rpm 離心10分鐘。RNA主要在上層無色的水相中,把水相轉(zhuǎn)移到新管中,不要吸到沉淀。
5. 吸附柱前處理:在吸附柱中加入500ul  洗柱液,室溫放置2分鐘,2-8  12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
6. 第4 步收集的上清中加入200ul無水乙醇混勻,加入吸附柱靜置2 分鐘,2-8  12000rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),2-8  12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8  12,000 rpm ℃ 離心2min,棄廢液。
9. 12000rpm離心2min,棄掉收集管,將吸附柱置于室溫放置數(shù)分鐘將吸附柱中殘余的漂洗液去除。
10.  將吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O ,室溫放置5min,12000rpm室溫離心2min即得到RNA

注意事項:
1 ,所有相關(guān)器皿耗材都應(yīng)為RNase-free產(chǎn)品,操作過程要小心,帶口罩、手套避免環(huán)境中RNA酶污染樣品。
2 ,RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9 之間,但這并不表示RNA不純,需電泳檢測。